Аналіз ІФА: розшифрування

Аналіз ІФА: розшифрування

Імуноферментний аналіз (ІФА) - це спосіб дослідження крові в лабораторії, заснований на пошуку спеціальних клітин - антитіл до різних захворювань. Метод дозволяє не тільки виявити збудника, а й встановити, на якій стадії знаходиться патологічний процес. Останнє дуже важливо для прогнозу і подальшого лікування пацієнта.

Переваги і недоліки методу

Серед усіх сучасних методів діагностики ІФА є найбільш інноваційним і технічно точним. Його основними перевагами є:


  1. Здатність пошуку всіх існуючих антитіл до інфекційних захворювань у крові пацієнта.
  2. Висока доступність методу дослідження. На сьогоднішній день аналізи методом ІФА може виконати будь-яка лабораторія середнього масштабу.
  3. Практично 100% специфічність і чутливість методу.
  4. Можливість пошуку антитіл і антигенів, а також встановлення стадії патологічного процесу і відстеження його динаміки, завдяки порівнянні кількості.

Така кількість переваг перед іншими аналізами повністю затьмарює один-єдиний недолік аналізу: він здатний виявляти антитіла, але не самого збудника.

Основні терміни для оцінки аналізу

Для того щоб розібратися в тому, який буває ІФА-аналіз, що це таке і як виконується, потрібно познайомитися з основними термінами, що застосовуються фахівцями.

  1. Антитіло - білок, який виробляється клітинами імунної системи людини (лімфоцити типу В). Вони відповідають специфічною реакцією на потрапляння в організм чужорідного агента або речовини. Інша назва антитіл - імуноглобуліни, вони належать до різних класів: A, E, M, G. Вони відрізняються один від одного масою, швидкістю реагування, періодом напіврозпаду і низкою інших характеристик. У нормі кров людини містить в основному імуноглобуліни класу G. Якщо відбувається якесь інфікування, то різко збільшується кількість імуноглобулінів A і M. Імуноглобуліни E беруть участь в алергічних реакціях.
  2. Антиген - чужорідний агент, що має органічне походження і високу молекулярну масу. Найчастіше являє собою збудників або їх біологічно активні речовини.
  3. Комплекс "" антиген-антитіло "", або імунний комплекс, - це безпосередньо комбінація чужорідної речовини та імуноглобуліну, що дає розвиток імунної реакції.

Суть і область застосування методу

У пацієнтів часто виникає питання: ІФА-аналіз, що це таке, як виконується і для чого він потрібен? Доступно про метод можна розповісти, описавши коротко його стадії.

Підготовча стадія. Лікар лабораторії використовує спеціальний планшет, в якому 96 лунок. На поверхню кожної лунки нанесено антиген певного збудника.

Стадія 1. Виконується забір крові, яку потім по краплі наносять на лунку. У лунці запускається реакція між антигеном і антитілом у крові.

Стадія 2. У лунці повним ходом йде реакція з утворенням імунних комплексів. У результаті утворюється речовина певного кольору. Інтенсивність забарвлення залежить від кількості антитіл у крові пацієнта до кожного конкретного збудника.


Стадія 3. Оцінка результату шляхом фотометрії. Для цього застосовується спеціальний прилад під назвою "" спектрофотометр "". За його допомогою порівнюється щільність матеріалу в лунці і контрольного зразка. Далі прилад шляхом математичного аналізу генерує результат.

Оцінка результатів і призначення ІФА

Інтерпретація результату залежить від декількох важливих нюансів:

  1. Оптичної щільності лунки.
  2. Виробника пластини з лунками (тест-системи).
  3. Лабораторії, в якій виконувалося дослідження.

Враховуючи ці нюанси, ніколи не слід порівнювати два результати з різних тест-систем або з різних лабораторій.

Ще одним важливим моментом, що впливає на аналіз ІФА, є так звана авидність антитіл. Цей параметр характеризує кількість антигену, міцність зв 'язку в комплексі "" антиген-антитіло "". В основі його визначення лежить обробка імуннокомплексу сечовиною з метою дозволу білкових структур. Це дозволяє зруйнувати слабкі зв 'язки між антигеном і антитілом і залишити тільки міцні. Значення дослідження на авидність полягає в тому, що з його допомогою можна дізнатися термін інфікування. Ця інформація надзвичайно важлива для постановки діагнозу вагітним жінкам.

Аналіз крові методом ІФА служить:

  1. Для пошуку різних антигенів збудників.
  2. Для дослідження гормонального фону.
  3. Для обстеження на наявність аутоімунної патології.
  4. Для виявлення маркерів онкологічних захворювань.

Різновиди ІФА

Аналіз ІФА має такі різновиди:

  1. Непрямий.
  2. Прямий.
  3. Конкурентний.
  4. Метод блокування.

Але на ділі сьогодні застосовується тільки спосіб під назвою ELISA (enzyme linked immunosorbent assay). У його основі лежить вищеописана реакція утворення комплексу антигену з антитілом зі зміною забарвлення на поверхні лунки.


Окремої уваги заслуговує безпосередньо кількісний ІФА-аналіз крові. Це не різновид аналізу, а спосіб оцінки результатів. Завдяки йому підраховується кількість антитіл і визначаються їхні класи. Результат залежить від оптичної щільності проби, тест-системи, на якій виконувався аналіз ІФА, а також від лабораторії.

Захворювання, що виявляються ІФА

ІФА - аналіз крові, що дозволяє виявити величезну кількість різних інфекційних захворювань. Притому з однаковою точністю виявляються як вірусні, так і бактеріальні захворювання. Наприклад, за допомогою утворення імуннокомплексів можна довести наявність антигенів збудників наступних захворювань:

  1. Вірусних гепатитів A, B і С.
  2. ВІЛ-інфекції та СНІДу.
  3. Вірусу Епштейна-Барр.
  4. Вірусу герпесу всіх видів.
  5. Цитомегаловірусу.
  6. Кору.
  7. Токсоплазмоза.
  8. Сифіліса і багатьох захворювань, що передаються статевим шляхом (ЗПВП).
  9. Паразитозів та інших захворювань.

Крім того, ІФА дозволяє виявити:

  1. Маркери онкологічних захворювань - ФНО (фактор некрозу пухлини), ПСА (простатспецифічний антиген), РЕА (раково-ембріональний антиген), СА-125 (маркер пухлин яєчників)
  2. Гормон вагітності - ХГЧ (хоріонічний гонадотропін).
  3. Порушення репродуктивної системи: гормони жіночої та чоловічої статевої систем.
  4. Патологію щитовидної залози.

Важливо згадати, що аналіз ІФА на ВІЛ сьогодні є головним способом діагностики цього небезпечного захворювання.

Матеріал для ІФА і техніка паркану

Для виконання ІФА у пацієнта проводиться забір крові натощак. Далі з крові отримують сироватку, яка безпосередньо використовується для проведення аналізу. Крім того, ІФА можна проводити на спинномозковій рідині (лікворі), сутичці цервікального каналу (шийки матки), навколоплідних водах і навіть рідині склоподібного тіла (очного яблука).


Перед здачею крові пацієнта попереджають про те, що він не повинен приймати ніяких лікарських препаратів, а лікування антибіотиками і противірусними препаратами рекомендується закінчувати не менш ніж за два тижні до забору крові.

Терміни отримання та розшифрування результатів

Терміни отримання відповіді з лабораторії залежить не від швидкості її роботи, а від того, на якій стадії знаходиться захворювання і які антитіла вже з 'явилися в крові. Так, наприклад: імуноглобуліни М з 'являються приблизно через 2 тижні після взяття крові на аналіз і означають, що процес знаходиться на стадії первинного інфікування або відбулося загострення хронічного. Одночасно антитіла класів M і G з 'являються при первинній інфекції. Притому останні можуть виявлятися через 4 тижні.

IgA з 'являються через 2-3 тижні або поодинці, або разом з М, означаючи гостру інфекцію, або разом з G, вказуючи на хронічний процес.

Такі різні терміни появи антитіл у крові змусять пацієнта довго очікувати результату. Припустимо очікування більше місяця після того, як виконаний аналіз ІФА. Розшифровка та інтерпретація лікарем також займають певний проміжок часу.